ساب کلونینگ ژن آنزیم گلوکوسربروزیداز موش سوری در وکتور لنتی ویرال و انتقال آن به رده سلولی hek

Authors

همایون نادریان

homayou naderian department of anatomy, kashan university of medical sciences, kashan, iranکاشان، کیلومتر 5 بلوار قطب راوندی، دانشکده ی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی کاشان، گروه علوم تشریح بهرام کاظمی

bahram kazemi آنتوآن دو وریس

af de vries

abstract

سابقه و هدف: ژن درمانی یکی از مهم­ترین شیوه های تحقیقات بالینی است که ارایه دهنده­ی روش های جدیدی برای درمان نقص های ژنتیکی می باشد. نقص ژنتیکی آنزیم گلوکوسربروزیداز ( gba ) عامل بیماری گوشه بیش از بقیه ی بیماری ها در ژن درمانی مورد توجه قرار گرفته است. هدف از انجام این پروژه کلونینگ و انتقال ژن آنزیم گلوکوسربروزیداز توسط لنتی ویرال وکتور ارتقایافته به رده ی سلول های hek می باشد. مواد و روش ها: مطالعه به روش تجربی و به منظور تولید و تکثیر cdna ژن آنزیم گلوکوسربروزیداز به کمک پرایمرهای اختصاصی به روش pcr انجام گرفت و در وکتور غیر بیان کننده، کلون و ترادف یابی گردید. سپس ژن نوترکیب را در لنتی ویرال وکتور ارتقایافته دارای ژن گزارش گر gfp ساب کلون شد. پس از کشت سلول های hek وکتور نوترکیب لنتی ویرال به آنها منتقل شد و انتقال ژن gba با استفاده از ژن گزارش گر gfp بررسی گردید. نتایج: تکثیر و کلونینگ ژن آنزیم گلوکوسربروزیداز با استفاده از آنزیم های محدودگر تایید گردید. ترادف های ژن gba با ترادف های گزارش شده­ی آن کاملا تطبیق داشت. ساب کلونینگ ژن gba در وکتور لنتی ویرال با استفاده از آنزیم های محدودکننده ی مختلف تایید شد. انتقال ژن نوترکیب gba توسط بیان ژن گزارش گر با استفاده از پروتئین های فلورسنتی تایید گردید. نتیجه گیری: در این تحقیق بخشی از فرآیند پروتکل ژن درمانی با انتقال ژن آنزیم گلوکوسربروزیداز موش به سلول های hek توسط وکتور لنتی ویرال انجام گرفت.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

ساب کلونینگ ژن آنزیم گلوکوسربروزیداز موش سوری در وکتور لنتی ویرال و انتقال آن به رده سلولی HEK

سابقه و هدف: ژن‌درمانی یکی از مهم­ترین شیوه‌های تحقیقات بالینی است که ارایه‌دهنده­ی روش‌های جدیدی برای درمان نقص‌های ژنتیکی می‌باشد. نقص ژنتیکی آنزیم گلوکوسربروزیداز ( Gba ) عامل بیماری گوشه بیش از بقیه‌ی بیماری‌ها در ژن‌درمانی مورد توجه قرار گرفته است. هدف از انجام این پروژه کلونینگ و انتقال ژن آنزیم گلوکوسربروزیداز توسط لنتی ویرال وکتور ارتقایافته به رده‌ی سلول‌های HEK می‌باشد. مواد و روش‌ها:...

full text

مدل‌سازی سرطان پستان متاستازی در موش BALB/c با استفاده از رده سلولی موشی و نشاندار نمودن پایدار رده سلولی با وکتور لنتی ویروسی

  مقدمه: متاستاز ، عامل اصلی مرگ­های با منشأ سرطان پستان است که علیرغم پیشرفت­های علمی اخیر، تغییرات ژنتیکی و مکانیسم­های مولکولی درگیر در متاستاز سرطان پستان هنوز به­طور کامل شناخته نشده­اند. مدل­های حیوانی مناسبی نیز برای بررسی مسیرهای سلولی و ژن­هایی که به­طور اختصاصی در جریان متاستاز سرطان نقش دارند، وجود ندارند. در مطالعه اخیر، مدل متاستازی سرطان پستان موشی با استفاده از رده سلولی 4T1 ایجا...

full text

استفاده از ویروس های نوترکیب مشتق از HIV-1 برای ترانسداکشن سلول های HT1080 با هدف ژن درمانی بیماران بتا - تالاسمی

سابقه و هدف: یکی از روش های درمانی موثر برای بیماری بتاتالاسمی، ژن درمانی توسط ویرال وکتورها می باشد. هدف از این مطالعه ساخت لنتی ویروس های نوترکیب حاوی ژن بتاگلوبین و mini LCR جهت انتقال سازه ژنی مورد نظر به سلول های هدف به منظور ژن درمانی بتاتالاسمی ماژور می باشد. روش بررسی: در این مطالعه بنیادی - کاربردی، هر یک از قطعات ژن بتاگلوبین و mini LCR در یک لنتی وکتور به نام pLenti-Destکلون شدند. طی...

full text

کلونینگ ژن هورمون رشد (GH) فیل ماهی (Huso huso) در سازه های لنتی ویروسی و غیر ویروسی و بررسی بیان ژن در سلولهای بنیادی جنینی انسانی

یکی از مهمترین کاربردهای مهندسی ژنتیک در تحقیقات آبزی پروری، افزایش میزان رشد ماهیان پرورشی از طریق انتقال ترنس ژنهای هورمون رشد به آنهاست. اما پیش از هر گونه تلاش در جهت انتقال ژن، ساخت و سنتز این ترنس ژنهای مطلوب الزامی است. از این رو در این تحقیق، ابتدا لنتی ویروس های نوترکیب حاوی ژن هورمون رشد (GH)فیل ماهی Huso huso به عنوان یکی از مهمترین گونه های ماهیان خاویاری تولید شد، سپس از آنها برای ...

full text

ساب کلونینگ و مقایسه ی فعالیت نوع طبیعی آنزیم تیروزیناز انسانی با انواع جهش یافته ی آن (m374t و m374d) در رده ی سلولی hek-293

آنزیم تک زنجیره ای حاوی مس تیروزیناز، یک گلیکوپروتئین غشایی نوع i است که به گروه پروتئین های وابسته به مس نوع 3 تعلق دارد. این آنزیم در جایگاه فعال خود دارای دو اتم مس است که هریک توسط سه ریشه ی بسیار حفظ شده ی هیستیدین در موقعیت مناسب برای واکنش قرار می گیرند. تیروزیناز انسانی از اکسیژن ملکولی برای انجام دو مرحله ی اول مسیر سنتز ملانین یعنی ارتو-هیدروکسیلاسیون l-تیروزین به l-دوپا (فعالیت تیروز...

مطالعه و ارزیابی استفاده از لنتی ویروس ها به عنوان حامل های انتقال دهنده ژن در سلول های فیبروبلاست انسانی (HDFs)

چکیده: زمینه و هدف: سلول های بنیادی پرتوان القایی Induced pluripotent stem cells= iPSc))، سلول های اولیه و تمایز نیافته ای هستند که قادر به ایجاد تقریباً هر نوع سلولی در بدن می باشند. هدف از پژوهش حاضر تولید و استفاده مؤثر از وکتور لنتی ویروسی TetO-FUW-OSKM جهت انتقال ژن ها به سلول های فیبروبلاست انسانی ((HDFs= Human fibroblast cells و در نهایت ارزیابی عملکرد این وکتور بود. روش بررسی: در این مطا...

full text

My Resources

Save resource for easier access later


Journal title:
فیض

جلد ۱۱، شماره ۱، صفحات ۱-۷

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023